Préparation de la lame d’analyse du frottis sanguin par IA

Shannon Mitchell Mis à jour par Shannon Mitchell

Prélever un échantillon de sang

  1. Sélectionnez la veine la plus grosse et l’aiguille appropriée pour le prélèvement sanguin.
  2. Utilisez la quantité minimale d’alcool et laissez sécher avant la ponction veineuse, car l’alcool peut provoquer une hémolyse de l’échantillon.
  3. Minimisez l’aspiration sur la seringue et ne la tirez pas trop rapidement.

Stockage d’échantillons de sang

  1. Une fois le sang prélevé auprès du patient, il doit être transféré dans un tube de prélèvement d’échantillon EDTA.
  2. Retirez l’aiguille de la seringue et retirez le couvercle du tube sanguin pour le transfert si vous n’utilisez pas un système BD Vacutainer®.
  3. Remplissez le tube jusqu’à la ligne de remplissage recommandée par le fabricant.

Étiqueter les lames

  1. Étiquetez les lames avec l’ID du patient et la date à l’aide d’un crayon.

Important : Les crayons-feutres et les stylos sont à éviter, car ils s’effaceront lors du processus de coloration.

Préparer la lame

  1. Mélangez le tube de sang avec anticoagulant EDTA.
  2. Utilisez un tube capillaire à microhématocrite ou une pipette de précision pour prélever du sang du tube fraîchement mélangé, et placez délicatement une goutte sur la lame identifiée. Veillez à ne pas heurter la lame contre le tube.

Important : Ne pas utiliser de tige en bois pour ce transfert de sang, car les plaquettes et les leucocytes ont tendance à y adhérer.

Poser la lame d’étalement

  1. Placez la lame d’étalement au-dessus de la lame identifiée, devant la goutte de sang, et la tenir selon un angle de 30° à 45°.

Étaler le sang

  1. Faites glisser la lame d’étalement vers l’arrière jusqu’à ce qu’elle touche la goutte de sang.
  2. L’action capillaire dirigera l’échantillon vers les bords de la lame.

Important : Ne pas laisser le sang atteindre les bords de la lame.

Terminer l’étalement

  1. Avant que le sang n’atteigne les bords de la lame, d’un mouvement souple, stable et régulier, repoussez la lame d’étalement pour l’éloigner de la goutte de sang, sur toute la longueur de la lame. Conservez le même angle pendant tout le mouvement, et ne pas appliquer de pression verticale. Ceci doit produire un film de sang uniforme couvrant entre la moitié et les deux tiers de la lame. 
  2. Laissez la lame sécher à l’air libre pour éviter les artefacts qui sèchent à l’air.
    Important : Ne fixez pas la lame à chaud.
  3. Une fois le frottis sanguin effectué, inspectez visuellement la lame. Le frottis doit ressembler à une empreinte de pouce et faire apparaître un bord en forme de plume à son extrémité.

Colorer la lame

  1. Lorsque vous utilisez une coloration de type Romanowsky (p. ex., Diff-Quik™), vous devez toujours scrupuleusement respecter les instructions de traitement du fabricant :
    1. Fixateur
    2. Coloration rouge
    3. Coloration bleu
    4. Rinçage à l’eau
    5. Séchage à l’air

Remplacez régulièrement la coloration selon les recommandations du fabricant ou lorsque compromise.

Placer la lamelle 

  1. Une fois la lame colorée et séchée à l’air, placez une goutte d’huile d’immersion sur le frottis.
  2. Placez ensuite une lamelle de 24 x 60 mm sur la lame.
  3. L’huile d’immersion permettra à la lamelle d’adhérer à la lame.
  4. La lame est maintenant prête à être numérisée par Vetscan Imagyst.

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Numérisation d’un frottis sanguin par IA

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