Przygotowanie preparatów mikroskopowych do analizy rozmazów krwi Vetscan Imagyst

Shannon Mitchell Updated by Shannon Mitchell

Pobieranie próbki krwi

  1. Wybrać największą żyłę i dobrać odpowiednią igłę do pobrania krwi.
  2. Zastosować możliwie niewielką ilość alkoholu i odczekać aż odparuje przed nakłuciem żyły, ponieważ alkohol może wywołać hemolizę w próbce.
  3. Stosować możliwie niskie podciśnienie w strzykawce i nie pociągać za tłok zbyt szybko.

Przechowywanie próbek krwi

  1. Po pobraniu krwi od pacjenta należy ją przenieść do probówki zawierającej EDTA.
  2. W przypadku niestosowania systemu BD Vacutainer®, zdjąć igłę ze strzykawki i osłonę z probówki transportowej na krew.
  3. Napełnić probówkę do wskazanej przez producenta linii.

Oznaczanie preparatów mikroskopowych

  1. Oznaczyć szkiełka podstawowe ołówkiem, podając identyfikator pacjenta i datę.

Ważne: Należy unikać stosowania pisaków i długopisów, ponieważ zmywają się podczas barwienia.

Przygotowanie preparatu mikroskopowego

  1. Wymieszać krew z antykoagulantem EDTA.
  2. Za pomocą kapilary mikrohematokrytowej lub pipety precyzyjnej pobrać krew ze świeżo wymieszanej probówki i ostrożnie umieścić kroplę na opisanym szkiełku podstawowym. Należy uważać, aby nie dotknąć szkiełka podstawowego końcówką kapilary bądź pipety.

Ważne: Do przenoszenia krwi nie należy używać drewnianych patyczków, ponieważ płytki i krwinki białe mają tendencję do przylegania do nich.

Pozycjonowanie szkiełka rozprowadzającego

  1. Umieścić rozprowadzające szkiełko podstawowe pod kątem 30°–45° na opisanym szkiełku z preparatem tuż przed kroplą krwi.

Wykonanie rozmazu

  1. Przesunąć szkiełko rozprowadzające tak, by zetknęło się z kroplą krwi.
  2. Siły kapilarne rozciągną próbkę wzdłuż krawędzi szkiełka rozprowadzającego.

Ważne: Nie dopuścić, aby krew dotarła do bocznych krawędzi szkiełka.

Dokończenie rozmazu

  1. Zanim krew dotrze do bocznych krawędzi szkiełka, płynnym i stabilnym ruchem przesunąć szkiełko rozprowadzające wzdłuż szkiełka podstawowego z preparatem. Prowadząc szkiełko rozprowadzające, utrzymywać stały kąt i nie dociskać szkiełka. Dzięki temu powinno się uzyskać jednolity rozmaz krwi pokrywający około ½ do ⅔ powierzchni szkiełka podstawowego. 
  2. Pozostawić preparat mikroskopowy do wyschnięcia na powietrzu, aby uniknąć artefaktów powstających podczas suszenia strumieniem powietrza.
    Ważne: Nie utrwalać preparatu termicznie.
  3. Po wykonaniu rozmazu należy dokonać wizualnej oceny preparatu. Rozmaz powinien przypominać odcisk kciuka, a jego końcowa krawędź powinna być postrzępiona.

Barwienie preparatu

  1. Stosując mieszaninę barwiącą metodą Romanowskiego (np. Diff-Quik™), należy ściśle przestrzegać instrukcji producenta dotyczących procesu barwienia:
    1. Utrwalacz
    2. Czerwony barwnik
    3. Niebieski barwnik
    4. Płukanie wodą
    5. Suszenie na powietrzu.

Barwniki należy wymieniać regularnie, zgodnie z zaleceniami producenta, lub gdy ich jakość ulegnie pogorszeniu.

Nakładanie szkiełka nakrywkowego 

  1. Po wybarwieniu preparatu i wysuszeniu go na powietrzu, nanieść kroplę olejku immersyjnego na rozmaz.
  2. Następnie nałożyć szkiełko nakrywkowe o wymiarach 24 × 60 mm.
  3. Olejek immersyjny umożliwi przywarcie szkiełka nakrywkowego do preparatu.
  4. Preparat jest teraz gotowy do skanowania za pomocą Vetscan Imagyst.

How did we do?

Skanowanie preparatu mikroskopowego do analizy rozmazu krwi Vetscan Imagyst

Contact